核酸检测的方法有很多种，目前主流的核酸检测技术是PCR检测。

一、什么是PCR？

PCR是聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction，PCR）是一种分子生物学技术，用于体外扩增特定的DNA片段。它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸、皮肤以及血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。

二、PCR是如何检测的？

PCR检测的步骤包括：从样本中提取和纯化RNA（核酸）；然后进行实时PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应），其中RNA被逆转录成cDNA；最后使用引物组扩增cDNA并使用特定探针进行检测。

该技术检测的是疑似感染新冠病毒的患者的SARS-CoV-2核酸。SARS-CoV-2是一种阳性单链RNA病毒，病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其他病原体的标志物。目前所开发的基于PCR的不同核酸检测技术，就是通过扩增基因组的不同片段实现的。

事实上，基于实时PCR的核酸检测本质上是定量的，但当前的临床 COVID-19 测试通常被测试制造商推广为定性测试（阳性/阴性）。使用商业试剂盒的临床实验室可以选择报告定量测量以及定性分类结果（阳性/阴性）。

现有证据显示，Omicron株传播力强于Delta株，致病力有所减弱，我国境内常规使用的PCR检测诊断准确性未受到影响。但核酸腐败等社会问题的出现，让民众质疑核酸检测的真实性。

三、PCR具体临床应用有哪些？

1.肿瘤：癌基因的表达增加和突变，在许多肿瘤早期和良性的阶段就可出现。PCR技术不但能有效地检测基因的突变，而且能准确检测癌基因的表达量，可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断。

几乎所有慢性骨髓性白血病患者都可检测到原癌基因易位导致的BCR/ABL融合基因形成，定量PCR技术可通过检测BCR/ABL融合基因的表达确定微量残余恶性细胞存在的数量，以此作为治疗效果和估计复发的危险性的依据。

一些病毒致癌作用也与病毒载量有关，EB病毒载量的FQ-PCR检测结果已被用于鼻咽癌早期发现和随访。

2.传染性疾病：PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上，只要样本有一个病原体存在，PCR就可以检测到。一般实验室也能检出10~100基因拷贝，而目前病原体抗原检测方法一般需要105-7个病原体才可检测到。PCR对病原体的检测解决了免疫学检测的“窗口期”问题，可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。

在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒定量研究中发现，病毒的数量与某些药物的疗效相关。例如，干扰素治疗对肝炎病毒高拷贝者不敏感，低拷贝者敏感；而有些药物则具有显著降低病毒高拷贝的作用。

3.遗传病：PCR技术首次临床应用就是从检测镰状细胞和β－地中海贫血的基因突变开始的。基因的突变和缺失均会引起各种珠蛋白的表达不平衡，用FQ-PCR检测各种珠蛋白基因表达差异，是地中海贫血诊断的有效手段。

(郑州市第九人民医院检验科 尹玲)