杜氏肌营养不良的诱发起因较为复杂，疾病带来了严重的危害性，且具有遗传倾向，损害了患者的肌肉健康，容易产生肌肉萎缩及无力的症状，该病的治疗工作固然重要，治疗之前还要进行全面的检查工作。下面我们来学习什么是杜氏肌营养不良症？其基因检测包括哪些？

一、什么是杜氏肌营养不良症DMD？

杜氏肌营养不良症DMD(Duchenne Muscular Dystrophy)，又叫假肥大型肌营养不良症，是最常见的一类进行性致死性肌营养不良症，由Duchenne(1868)首先提出。临床以缓慢进行性加重的对称性肌无力和肌萎缩为特征，可累及肢体和头面部肌肉，少数可累及心肌，男性患病率 1/3500，为X－连锁隐性遗传。由位于Xp21的抗肌萎缩蛋白基因突变而引起抗肌萎缩蛋白完全或部分缺失所致。大多数DMD的患儿会在3-5岁之间发病。常见的首发症状包括血清肌酸激酶升高、步态不稳、步态异常、爬起困难以及频繁地摔倒等，常见体征有双腓肠肌假肥大，同时可有双前臂及舌肌假肥大，Gower’s征阳性，腰椎前凸、翼状肩胛。我国每年约有400-500例DMD患儿出生，累计约7万人确诊为DMD，是世界上该病患者人数最多的国家之一。本病主要是男孩发病，通常5岁左右发病，大多数女性不患病，可能为致病基因的携带者，少数患病女性可能与X染色体失活有关。

二、杜氏肌营养不良症的病因

DMD基因位于Xp21.2-3，是已知人类最大的基因，主要作用是产生抗肌营养不良蛋白（dystrophin），该蛋白主要在骨骼肌和心肌细胞膜内面表达，是一种细胞骨架蛋白，其主要作用是稳定和保护肌纤维。DMD基因致病性变异最终会导致抗肌营养不良蛋白的缺乏或减少，肌纤维的完整性遭到破坏，进而引发肌纤维坏死、肌肉纤维化和再生能力丧失，严重者可见纤维结缔组织和脂肪组织替代正常的肌肉组织，出现肌肉假性肥大的典型表现。

三、杜氏肌营养不良症的基因检测

DMD患者约1/3为新发突变，其余为X染色体隐性遗传；外显子缺失变异占55%-65%；重复变异占5%-10%；点突变（无义突变、引起移码的突变、内含子与外显子剪接接头突变）占30%左右。一般先用多重连接探针扩增技术（MLPA）检测DMD基因大片段缺失和重复，目前 DMD 基因检测方法很多，有毛细管电泳法、多重连接探针扩增技术（MLPA）、变性梯度凝胶电泳法（DGGE）变性高效液相色谱(DHPLC)、多重 PCR 和 STR 连锁分析、高通量测序技术（NGS）等。毛细管电泳需特殊仪器，操作较繁琐。多层探针杂交技术（MAPH）是 White 等设计用于检测缺失热区之外的稀发突变技术。Schouten 等在 MAPH 技术的基础上作一改进，设计出 MLPA 技术用于检测缺失和重复突变，是目前检测缺失和重复突变的重要技术，尤其对受累者致病性突变未知的女性携带者基因突变的筛查更为重要，其操作简便、高效，DNA 用量少，但技术条件要求高，所需成本大。高通量测序技术（NGS）是检测微小突变的常用方法，点突变检出率可达 75%，具有高效、经济、自动化程度高的特点，需特殊设备和操作技术，所需费用高。STR-PCR 扩增产物在聚丙烯酰胺凝胶电泳后，可分离出相差1~2 bp 的扩增片段，分辨力很高，操作较繁琐，结果分析有主观性，但成本低，常规设备，只需1～2d就能提供 DMD 家系有价值的遗传连锁信息，符合临床基因检测的要求，由于染色体交换的存在，可能造成诊断无创。目前对于DMD的基因诊断，一般先用MLPA检测DMD基因大片段缺失和重复，如果未发现此类拷贝数异常再用高通量测序技术（NGS）检测微小突变。

总之，杜氏肌营养不良肌通常表现为患者发育迟缓。坐、站、走都比普通孩子晚，往往会在会走路后才被发现。走路时步伐缓慢，步态不稳，左右摇摆，犹如“鸭步”；而且很容易摔倒，蹲下后不能快速站起来等。因此，当发现孩子有类似症状时，最好提高警惕，及时就医诊断，必要时进行产前诊断，避免生育另一患者。

（郑州大学第一附属医院妇产医学部遗传与产前诊断中心 刘莉娜）