结核分枝杆菌的PCR检测技术:TB-DNA
2023-2-9 来源:医药卫生网 - 医药卫生报 浏览:次 【查看证书】TB-DNA检测是结核分枝杆菌的一种检测方法,是用核酸检测技术对结核分枝杆菌进行检测,可以快速准确地检测出被检者是否感染结核分枝杆菌,检测结果一般显示为阴性或者阳性。
TB-DNA是结核分枝杆菌基因的英文简称,TB-DNA检测是指结核分枝杆菌基因扩增检测,为临床中诊断肺结核常用方法之一,临床中取痰液标本是最简便、最快捷的方式,被检者自行咳嗽痰液标本,但经常受到气道、口腔等污染,影响临床检验结果,为提高痰液标本获取质量,近年临床中常采用支气管镜灌洗痰液标本进行TB-NDA检测。TB-DNA可以快速准确地对被检者进行诊断,也可以对确诊感染结核分枝杆菌患者的治疗效果进行检测。
一、检查前准备
1、了解病情、检查的目的,保持放松的心情。
2、保证正常饮食和睡眠。
二、操作方法
1、标本类型有痰液、脑脊液、肺泡灌洗液、胸膜腔积液(胸水)、腹膜腔积液(腹水)、尿液、血液、分泌物等。
2、痰标本中含有大量黏蛋白和杂质,故在核酸提取前,需对样本进行前处理,即用NaOH或变性剂进行液化洗涤。处理后的标本如不立即用于核酸提取,可保存于-20℃。
3、胸膜腔积液、腹膜腔积液穿刺液含菌量少,需要较多的标本,离心后取沉淀进行检测。如果含有大量蛋白质和杂质,需用NaOH对样本进行前处理。处理后4℃保存不超过24h,-20℃保存不超过3个月,-70℃可长期保存。冰冻保存后不宜反复冻融。
4、如标本含血,必须加红细胞裂解液处理。处理后4℃保存不超过24h,-20℃保存不超过3个月,-70℃可长期保存。冰冻保存后不宜反复冻融。
三、参考范围及结果
检测结果阴性(实时荧光PCR定性)。TB-DNA定量测定结果小于实验室设定的参考下限(实时荧光PCR定量)。
如果检测结果为阴性,那说明被检者体内没有结核分歧杆菌的存在,是正常的,如果被检者的检测结果为阳性,那就说明体内有结核分枝杆菌存在。
四、临床意义
1、快速诊断。因结核分枝杆菌培养周期长,临床很难采用培养的方法进行结核分枝杆菌感染的快速检测。通过对痰液、血液、脑脊液等标本中结核分枝杆菌的PCR检测,可以快速诊断肺结核、结核分枝杆菌菌血症、淋巴结核、结核性脑膜炎、结核性胸膜炎及腹膜炎等。
2、治疗监测。在结核治疗中,采用实时荧光PCR法定期检测,可评价抗结核药物的疗效。
3、PCR检测的是病原体核酸,不管结核分枝杆菌是否为活的细菌,实时荧光PCR法均能检出。因此,在抗生素治疗一个疗程后,必须两周后才能做PCR检测,以免造成假阳性结果。
结核分歧杆菌感染后常见的疾病为肺结核,肺结核具有传染性,可通过空气飞沫、消化道等方式传播,如果在检查中发现其指标异常,请及时就医。
(社旗县人民医院检验科 宋庭印)