金黄色葡萄球菌也叫金葡菌，属于葡萄球菌科，葡萄球菌属，是革兰阳性菌的代表菌。金黄色葡萄球菌主要寄生在人鼻腔，尤其是寄生在鼻前庭后部，对一般人群来说，最近已经确定鼻腔内金黄色葡萄球菌的总携带率达到41%。通过鼻腔可以转移到皮肤和身体的其他部位，如咽喉、肠道、阴道、破损的皮肤皱褶、腋窝及会阴部。金黄色葡萄球菌引起的疾病以化脓性感染和毒素性疾病多见。包括皮肤软组织感染（SSTIs）、无菌组织和内脏器官感染、全身性感染和异物相关性感染（FBTIs）。感染后患者可因细菌毒素释放入血，出现剧烈的寒战反应，随后体温可迅速升高至40℃，还会伴随全身肌肉关节和腰背部的酸痛、乏力、食欲不振等症状。在医疗保健机构内可通过医务人员的手和物品在患者之间传播，这对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）传播至关重要，产生耐热肠毒素的金黄色葡萄球菌也是一种常见的食源性致病微生物。

一、生物学特性：

1、形态与结构：球形，圆形，直径0.5～1.5μm，单个、呈对、四联、短链，以不规则葡萄状或呈簇排列为主，革兰染色G+，无鞭毛和芽孢，个别形成有限的荚膜。

2、培养特性：多数葡萄球菌是兼性厌氧，营养要求一般，最适pH7.4~7.6，在34～37℃大气环境下，在血琼脂、营养琼脂、脑心浸液琼脂等平板上，经24小时孵育，可形成直径1～3mm、圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐不透明、产脂溶性色素、有溶血环菌落；抵抗力：耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽孢细菌。

二、微生物的检验及鉴定

1、标本采集：血液、脑脊液、脓汁、渗出液、穿刺液、分泌物、尿液、痰液、鼻拭子、咽拭子、粪便、呕吐物或食物等。

2、形态学检查：标本或增菌液直接涂片，革兰染色镜检可见革兰阳性球菌呈葡萄串状排列。

3、鉴定方法：

（1）分离培养：血液或脑脊液等标本肉汤增菌35℃ 24h后或脓汁、痰液、鼻拭子、咽拭子、粪便、尿道分泌物等自己接种分离培养于血琼脂平板。35℃18～24h，可见形成直径2mm，圆形凸起、光滑，呈金黄色、白色或柠檬色菌落。菌落周围有透明的β溶血环。粪便、呕吐物或剩余的食物标本接种于高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板，经35℃ 18～24h培养，可形成细小菌落，48h后在高盐卵黄平板上菌落周围形成白色沉淀环，在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色典型菌落。

（2）触酶试验：取待测菌落少许涂布于洁净的载玻片上，在其上滴加1滴3%双氧水，玻片上快速产生丰富的气泡者为阳性，金葡菌该试验阳性。

（2）血浆凝固酶试验：是鉴定致病性葡萄球菌的重要指标，具体的检测方法分为玻片法和试管法两种。

   玻片法将待试菌落乳化于玻片上的盐水中，经10～20S证实无自凝后，用接种环取EDTA抗凝人或兔血浆一环，与乳化菌液混合，出现凝集者为阳性，另设生理盐水为阴性对照。

   试管法吸取0.5mL血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置35℃培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。金葡菌血浆凝固酶试验玻片法和试管法均阳性。

（3）耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺蓝-DNA平板，35℃培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。

（4）甘露醇发酵实验：金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。

（5）Slidex Staph Plus胶乳凝集实验：是鉴定金黄色葡萄球菌的一种快速、简便的商品化直接凝集试验。其基本原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和抗金黄色葡萄球菌单克隆IgG抗体的聚苯乙烯胶乳，然后用接种环挑取待鉴定菌株的新鲜培养物加入混匀，若出现凝集块现象即为阳性，此实验不仅可测金葡菌的凝固酶，还可检测其A蛋白。

（6）生化鉴定如上述，注意与其他凝固酶阳性的葡萄球菌的鉴别要点：PYR吡咯烷酮-β-萘基酰胺试验阴性；VP试验阳性；鸟氨酸脱羧酶试验阴性。

（7）肠毒素检测：取食物中毒患者呕吐物或剩余食物接种于高盐肉汤培养基，35℃培48小时，将肉汤煮沸30分钟，离心沉淀取上清液2ml注射到4~6周龄幼猫腹腔内，若注射4小时内发生呕吐、腹泻、体温升高或死亡等现象者，提示有肠毒素存在的可能。现常用酶联免疫吸附试验ELISA法或特异性核酸杂交、PCR技术检测其肠毒素。

（8）免疫学方法：用ELISA法和对流免疫电泳方法可检测金葡菌的磷壁酸抗体。

（9）分子生物学方法：包括PFGE脉冲场凝胶电泳以及酶切图谱分析等。

（10）其他鉴定试验：临床上常用商品化或自动化鉴定及药敏系统。

（11）核酸快速检测MRSA： 取新鲜粪便、含漱液、痰液及脑脊液等标本，检测mecA基因，鉴定MRSA。主要有多位点检测甲氧西林耐药编码基因mecA和mecC，以及其他金黄色葡萄球菌特异靶位。单位点检测葡萄球菌染色体mec基因盒的3’末端和邻近金黄色葡萄球菌染色体5’orfX区域。

以上是金黄色葡萄球菌的生物特性以及鉴定方法，希望可以帮助大家对金黄色葡萄球菌的感染及与之相关医院感染的预防和控制有进一步认识。