培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，最好现配现用。 

简介：培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有水、氮源、无机盐（包括微量元素）、碳源、生长因子等。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，均改制成粉末。

培养基配置原则：1、选择适宜的营养物质。2、营养物质浓度及配比合适。3、控制pH条件。4、控制(redoxpotential)。5、原料来源的选择。6、灭菌处理

化学分类：1、天然培养基  天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。2、组合培养基  合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。3、半组合培养基  指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如，马铃薯蔗糖培养基。

物理分类：1、液体培养基  80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。2、固体培养基  一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。3、半固体培养基  指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。4、脱水培养基  又称预制干燥培养基，指含有除水分外的一切成分的商品培养基。

微生物分类：1、选择性培养基：一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。2、鉴别培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌落的培养基。

常见培养基：1、细菌培养基。2、牛心培养基。3、根瘤菌培养基。4、放线菌培养基。5、微藻培养基。6、真菌培养基。7、食用菌菌种培养基。8、烟草的培养基。9、动物细胞培养基。10、选择性培养基。11、酵母菌富集培养基。

制备基本方法：1、培养基配方的选定  同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。

2、培养基的制备记录  每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源．和各种成分的牌号。最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。

3、培养基成分的称取  培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．最好一次完成，不要中断。可将配方置于旁侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。完全称取完毕后．还应进行一次检查。

4、培养基各成分的混合和溶化  培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化，也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中融化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其他成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。

培养基pH的初步调整：培养基各成分完全溶解后，应进行pH的初步调整，因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2。而肠浸液pH却会有显著的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH，保证培养基的质量。pH调整后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。

培养基注意事项：  培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其他：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果；前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作（至少应在除菌后进行一次）。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞（尤其是细胞库）的污染。

（睢县人民医院检验科 倪国敏）