现在微生物关注度很高，很多机构参与到研究微生物检测工作中。要确保微生物检测方法准确，就要掌握检测基础知识，包括接种、分离纯化、培养、微生物保藏，下面简要介绍：

一、接种

    进行微生物接种，就是在活的生物体内或者在人工培养基上让微生物繁殖。

    接种的方法有很多种，都要合理使用工具进行接种，诸如用于接种针、接种环、接种圈、接种锄、小解剖刀以及玻璃涂棒等等，根据具体的接种需要合理使用。较为常用的接种方法有八种，即划线接种、三点接种、穿刺接种、浇混接种、涂布接种、液体接种、注射接种以及活体接种。其中，最为常用的是划线接种法，尤其是斜面接种以及平板划线过程中采用这种方法非常有效；进行霉菌形态研究的过程中，这种方法是比较有效的，使用接种针将细菌接种在半固体培养基上，细菌在穿刺线周围生长。

二、分离纯化

    如果培养物中的微生物至少为两种，即为混合培养物。如果菌落中的细胞均为一个亲代，此菌落是纯培养。鉴定菌种过程中，对于微生物的一项要求就是经过分离纯化的纯培养物。进行这项操作的过程中有很多方法，诸如倾注平板法、涂布平板法、平板划线法、富集培养法、厌氧法、单细胞分离法或者单孢子分离法。其中，操作最简单的方法为平板划线法，对接种环无菌处理之后，去除少许的培养物放置在平板上划线，当接种环接触到培养基表面并后移，接种环上的菌液稀释，此时单个细胞分散在线上，每一个细胞经过培养之后都会形成菌落。

三、培养

    其一，根据是否需要氧气进行培养可以分为两种类型，一种为好氧培养，另一种为厌氧培养。

    好氧培养，就是让微生物在有氧环境中培养。实验室操作过程中，采用斜面培养方式，就是用棉花塞获得空气，能够保证空气中没有细菌。使用三角烧瓶液体培养，需要对烧瓶摇床振荡，以使瓶中进入空气。

    厌氧培养，就是让微生物在没有氧的环境中培养，其中的重要操作就是将培养基中的氧气去除。

    其二，培养基的不同物理状态可以分为两种类型，一种为固体培养，另一种为液体培养。

    固体培养，就是将菌种接到固体培养基上，要保证培养基疏松而且营养丰富，条件合适就可以培养微生物。

    液体培养，就是使用培养液繁殖微生物，迅速非常快，获得大量的培养物，条件允许的情况下，这种方法能够有效增菌。

四、微生物保藏

    微生物保藏就是要保证选择的纯培养物质量优良，为其创造休眠环境，以在低温、真空、干燥环境长期保存过程中菌种维持良好特性。微生物保藏所采用的基本措施五种，即定期移植法、液体石蜡法、真空冷冻干燥法、-80℃低温冻结法、液氮超低温冻结法。其中，定期移植法适合于短期保藏，效果良好；真空冷冻干燥法、液氮超低温冻结法和-80℃低温冻结法适合于长期菌种保存。

综上，要将微生物检测工作做到位，就要对有关基础知识准确掌握。从微生物接种、分离纯化、培养以及微生物保藏，整个流程都要严格执行，才能保证检测结果的有效性。 

（新蔡县人民医院检验科 崔东东）