新冠病毒核酸检测的相关知识

2023-8-11 来源:医药卫生网 - 医药卫生报  浏览:次  【查看证书
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新冠病毒属于β属的冠状病毒,为RNA病毒,与其他病毒一样,新型冠状病毒基因组也会发生变异。新冠病毒的原始毒株毒力很强,但病毒为了生存下去,它必须要改变自己来适应环境,开始从原始毒株突变,突变进化到阿尔法、贝塔、德尔塔,每一波进化速度非常快,而且后者迅速取代前者。目前新冠病毒感染患者90%以上都表现为无症状和轻型,主要是上呼吸道的症状,很少有肺炎或是重症肺炎,非常接近季节性流感。检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR。因为核酸标本并不能直接测试,而是要先提取核酸,对其进行扩增。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子产生。通过不断的比对监测值与预先设定的阈值的循环数(Ct值)来反映病毒浓度。这个扩增过程是一个比较耗时的过程,而且检测标本一旦进入扩增环节就不能停止。荧光定量PCR检测技术是20世纪80年代中期发展起来的一项体外核酸扩增技术,它可以将目标基因片段于数小时内扩增百万倍至数亿倍,成为当今生物医学研究最为重要且广泛使用的技术手段之一。新冠病毒核酸检测的主要步骤有以下几个方面:

 

1.标本采集:

咽拭子标本采集,这是核酸检测流程的第一步,采集完的标本要迅速放入样本保存管中,保存管内红色保存液具有灭活病毒的作用,可以保证检测标本在送往检测点过程的有效性。

2.标本转运:

标本在严密包装下被运送到实验室,在运输全过程中有严格的保护措施,既防止标本损坏同时也要保证安全无泄漏。

3.标本录入:

工作人员逐一拆开包装,将每一份标本的信息录入系统,这个“登记”的过程,也是为了更好地对接大家的后续报告。

4.提取核酸:

专业技术人员将标本里核酸提取出来,检验人员戴着双层手套,在生物安全柜内一管一管地拧开螺旋盖,手工吸取样本,加入核酸提取板孔中,再拧上螺旋盖将标本放回原处。

5.配制试剂:

多少份标本就需要配制多少份试剂,全手工分装。

6.加样:

提取好的核酸只需要加入5-20 ul进入反应试剂体系进行扩增。

7.上机检测:

经过复杂的前期制备工作,才能在PCR仪上进行扩增检测。上机后,就是历时约1.5小时扩增检测,而且中间不能有停顿、不能有断电、不能有仪器故障,核酸检测才能完成。

8.输出报告:

走完上述步骤后,检测人员需要对扩增结果进行分析,包括同批随样本检测的阴阳性质控结果是否在控、基线设置、逐孔分析内标及样本结果是否正常等。当阴阳性质控全部符合检测要求,排除假阴性、假阳性可能,对异常结果样本及时进行复核,确保无误后才能最终报告结果。

(郑州大学第一附属医院检验科 万军虎)

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