结核病是由结核分枝杆菌引起的疾病，可侵及许多脏器，以肺结核感染最为常见。起病可急可缓，多为低热（午后为著）、盗汗、乏力等；呼吸道症状有咳嗽、咯痰、咯血、胸痛、不同程度胸闷或呼吸困难。结核病具有传染性并可通过空气传播，它是仅次于新冠肺炎的第二大传染病杀手，是全球第十三大死因。COVID-十九大流行，打破了多年来在消除结核病方面取得的进展，并且合并COVID-19的结核患者可能有更严重的预后。在2022年全球结核病报告中，与2020年相比，2021全球结核发病率上升了3.6%，打破了过去20年间每年约2%的下降趋势。

结核分枝杆菌核酸检测是结核病诊断的重要检测手段。结核分枝杆菌是导致结核病的致病病原体，临床中进行病原体检查是疾病确诊的金标准，比如选择各种分泌物（如痰液、灌洗液等）进行涂片镜检，或者是进行分离培养。一旦发现结核分枝杆菌，可以起到确诊的价值。结核病的诊断需要结合患者症状、体征、影像学检查结果，以及其他多种辅助诊断方法进行综合判断。现在应用于结核病诊断的实验室检测方法有：细菌学检查、分子生物学检查、结核病理学检查、免疫学检查等方法。国内目较前沿的技术为结核分枝杆菌核酸检测，采用的方法有探针法、PCR包括实时PCR、DNA印记杂交法等，可以检测出极微量的结核分枝杆菌，敏感性以及特异性非常的强，是诊断结核病的重要检查项目。结核菌的耐药情况也是目前国际上非常严重的现象。耐药结核病的实验室诊断主要依靠传统的培养依赖性药敏试验（Drug susceptibility testing，DST）和核酸扩增试验（Nucleic acid amplification test，NAAT）。传统的DST涵盖的药物更全面，可以获得准确的药敏信息。但由于结核分枝杆菌的生长周期较长，需要1～2个月的培养才能取得效果，在此期间，耐药结核病患者的药物治疗若没有效果，将给患者造成更大的身体、心理和经济压力。

河南省胸科医院检验科医学检验科开展的结核病一体化检测项目，包括结核分枝杆菌复合群核酸检测（恒温扩增-实时荧光法）和结核分枝杆菌药物耐药突变检测（荧光PCR溶解曲线法）。结核病一体化检测系统涵盖结核分枝杆菌鉴定、结核分枝杆菌耐药检测、非结核分枝杆菌菌种鉴定、个体化用药检测、结核分枝杆菌分子分型等应用，涉及结核病诊断、治疗、个体化用药及流行病学研究等。

结核分枝杆菌复合群核酸检测采用PCR荧光探针技术，用于辅助结核病的病理诊断。结核分枝杆菌（tuberclebacilli，TB）复合群主要包括结核分枝杆菌、牛结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌，除田鼠分枝杆菌外，其余三种均对人致病，是结核病的病原菌，可通过呼吸道、消化道和破损的皮肤黏膜进入机体，侵犯多种组织器官，引起相应器官的结核病，以肺结核最常见。PCR荧光探针技术可对IS6110基因进行检测，适用于临床上结核病的辅助诊断。此技术检测时间仅为一个工作日，打破了传统的结核菌培养方式，大大缩短了医生的诊断治疗时间。

结核分枝杆菌药物耐药突变检测（荧光PCR溶解曲线法）是基于探针溶解曲线技术的结核分枝杆菌耐药突变检测，可在数小时内实现对结核分枝杆菌异烟肼、利福平、氟喹诺酮、链霉素、乙胺丁醇耐药突变进行快速检测，实现耐药结核病的快速体外诊断，快速知晓患者的耐药情况，指导临床选择正确的用药方案，提高结核病治疗的精准性。具有灵敏度高、准确性高、操作简单等优点。

（河南省胸科医院 汪领）