免疫学检验是临床免疫学的重要组成部分，在临床疾病的诊断、治疗监测、预后等环节发挥着举足轻重的作用。在临床免疫检验过程中，有很多因素会影响检验结果，从而影响医生对疾病的诊断，最常见的就是外源性因素和内源性因素。外源性因素是由外界或人为原因造成的，包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长和标本凝固不全等，这些因素会不同程度的影响免疫测定结果。内源性干扰因素包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体等。那么，临床免疫检验有哪些常见问题呢？

一、荧光免疫检验常见问题

影响荧光免疫检验的因素主要是荧光抗体制备，待测标本制备以及实验条件等。在此，用于标记的抗体采用高亲和力和高特异性，通常采用单克隆抗体，鉴定抗体效价时，使之大于1:16较为理想，同时F/P比率以2:4为宜。

二、免疫凝集检验常见问题

免疫凝集检验的敏感性可随所用抗原不同而不同，并且由于存在共同抗原现象，会出现交叉反应；当抗原抗体比例适当时才有可见的凝集反应；污染的血清标本随着污染时间的延长会出现效价下降。在检验过程中，反应时间、温度、酸碱度，离子强度，震荡等因素都会对免疫结果造成影响。

三、酶免疫检验常见问题

酶免疫检验主要受试剂盒原材料、标本、实验室环境及操作等因素影响。由于不同厂家在原材料选择上不尽相同，使得EIA检测结果在灵敏度、特异性、稳定性和操作简便性上有一定的差别，抗体的特异性决定了整个测定方法的特异性，而抗体的亲和力制约着测定方法的灵敏度和测定下限。因此，选择高亲和力和高特异性的抗体十分重要。标本因素中，若不小心混淆患者的标本则最后结果完全不同。实验环境包括设施、温度、湿度、采光照明和电源质量等。在实验中因操作不当造成的误差也是影响EIA的常见原因。

四、免疫沉淀检验常见问题

免疫沉淀即抗原抗体发生反应，产生肉眼可见的凝集反应，其影响因素即是抗原抗体本身因素、反应基质因素和实验环境因素。因此，调节合适的抗原抗体比例进行反应，使用高亲和力抗体或者抗体片段来降低标本对总测定体积的比例，并在测定缓冲液中加入免疫球蛋白、理想的温育温度和较长的温育时间等，来降低反应基质因素，可控制适当的酸碱度和温度来抵抗环境因素的影响。

五、化学发光免疫检验常见问题

影响CLIA结果的最主要因素就是标本和试剂，新鲜标本和检测结果更能反映机体的真实情况，应在采血后24小时就完成检测，若待测抗原浓度过高，易出现钩状效应，使结果偏低，应对标本进行适当稀释。

六、放射免疫检验常见问题

在放射免疫检验中，被测物质浓度是根据标准曲线计算得来的，标准曲线和精确度直接影响测定结果和准确度，同时，实验过程需要严格把关和精确操作。因此，检测试剂中的标准品需要与被测物同源且稳定性好，容易保持，抗体可多用克隆抗体，效价高的标记物需要有高分析度，操作人员需要有扎实的理论基础和基本操作培训技术。

对于临床免疫检验来说，保证标本质量是保证检验结果准确性的前提，因此在质量控制上要重视起来。在临床免疫检测过程当中应当严格遵守各项规章制度，做好室内室外质量控制，提高临床检测结果的质量。

（焦作卫生医药学校附属医院检验科 张利红）