
细菌内毒素检测的临床应用
2023-10-17 来源:医药卫生网 - 医药卫生报 浏览:次 【查看证书】细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁包层中的脂多糖成分(LPS),具有多种的生物活性,微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应,因此内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
什么是内毒素?
细菌内毒素,又称为“热原”,细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的特有结构,细菌在存活状态时不释放出来,只有当细菌死亡自溶时才释放到细胞外,表现多种毒性作用,为区别于外毒素而称之为内毒素。细菌内毒素是由脂多糖(LPS)、蛋白质和磷脂组成的高分子量复合物,发挥毒性的成分主要为类脂质A(Lipid A),类脂A是LPS活性不可缺少的部分, 可视作LPS 的“生物活性中心”。内毒素位于细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌的内毒素的毒性作用较弱,大致相同,可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。内毒素耐热而稳定,抗原性弱。可刺激机体产生抗体,但无中和作用,形成抗毒素,经甲醛处理不能成为类毒素。
内毒素的检测方法有哪些?
细菌内毒素检查法(中国药典2020年版通则1143)包括凝胶法和光度法,后者包括浊度法和显色基质法。
1. 凝胶法的优点是操作简便 ,供试品在排除干扰作用后均可使用凝胶法进行检验。
2. 光度法(包括浊度法和显色基质法)可定量检测内毒素的含量,能较为准确评估产品在生产过程中污染的相对风险,定量检测的数据不仅有利于追踪产品质量趋势,还能起到风险预警的作用,达到数据完整性的要求。光度测定法可通过回收率判断出干扰的趋势,尤其对于研究性质的样品(如新产品)更具有优势。由于光度法的检测范围比凝胶法宽,使得有干扰的样品可以有更大的稀释倍数。
显色基质法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,分为终点显色法和动态显色法(本实验室使用该检测方法)。终点显色法依据反应混合物中内素浓度和其在孵育终止时释放出的呈色团的量之间存在的量化关系来测定内毒素含量的方法。动态显色法是检测反应混合物的吸光度或透光率达到某一预先设定的检测值所需要的反应时间,或检测值增加速度的方法。
细菌内毒素检测应用范围
细菌内毒素的检测可广泛应用于:
1.呼吸科:急性呼吸窘迫综合征,肺炎、慢支。
2.烧伤科:烧伤感染。
3.消化科:肠源性内毒素血症,肝胆疾病、急性胰腺炎。
4.传染科:肝炎、肝硬化。
5.肿瘤科:肺癌、肝癌等。
6.神经内、外科:脑血栓、脑梗死、脑膜炎、脑脓肿,硬膜外脓肿、脑外伤、昏迷等。
7.心内科:心肌炎、心膜炎、手术等。
8.泌尿内、外科:肾功能衰竭,泌尿系统感染,尿毒症,肾移植等。
9.妇产科:产道感染、无菌性手术后。
10.小儿科:儿科感染、脓毒症、感染性休克。
11.重症监护室(ICU):多器官功能衰竭、弥散性血管内凝血、全身性炎症反应。
12.急诊科:体征不稳定者、休克、昏迷。
13.血液科:菌血症、败血症、脓毒症、SIRS。
14.外科:开放性创伤、大手术术后。
15. 皮肤科:银屑病、牛皮癣、皮炎、皮肤过敏等。
16.广义上讲:收治的生命体征不稳定的患者,白细胞增多或减少,血小板明显减少,出血倾向,血糖变化,低血压,心力衰竭,肝肾功能异常,肝脏损伤,神经系统症状,发热,体温升高,肿瘤细胞坏死,休克、表情淡漠、痛苦、嗜睡、昏迷、已明确有肠道疾病,有出血表现、有栓塞坏死表现、血压降低、少尿等等。
17.人体内毒素的来源:外源性途径:开放性创伤,大手术后,烧伤,注射药品及溶液。内源性途径:感染、休克、肠道疾病肝脏疾病。
(新郑华信民生医院 周豪)