当临床医生怀疑患者得了淋巴瘤时，需要切除患者的淋巴结或者病变组织标本送到病理科进行“化验”，此时患者及家属往往想尽快的知道病理结果是什么：是淋巴瘤吗？是哪种类型的淋巴瘤？因为这与患者是否需要治疗及接受怎样的治疗密切相关。而目前，WHO淋巴瘤的种类有一百多种，种类多，分类复杂，病理医师往往需要综合显微镜观察、免疫组化、甚至分子检测才能诊断清楚，这个过程通常至少需要等待3—5天、常常是更长的时间。那么淋巴瘤的病理诊断流程有哪些呢？下面跟我一起了解一下吧。

第一步：活检、组织处理与制片：1. 活检：通过活检可以获取病变的标本用于后续的诊断。通常有以下几种标本类型：（1）组织标本：通过手术切取、切除、内镜下活检或空芯针穿刺等方法获得，标本需合格、足量，避免严重的器械性损伤且需避开坏死组织取材，多个淋巴结肿大时，宜选择浅表、容易获取且有代表性的淋巴结取材，一般宜选择颈部淋巴结。（2）细针吸取细胞学检查：不能作为淋巴瘤的首诊依据，但可用于淋巴瘤疑似病例的初筛以及部分确诊病例复发或可疑复发病灶的确认，在某些特殊情况亦可用于疾病诊断（如非实体性淋巴瘤、体液标本或获得病变组织较为困难时），通常需要制成细胞块，辅以免疫组化、流式细胞和/或分子检测协助诊断。以上标本需在离体30分钟内送至病理科（不能及时送检的标本可用生理盐水湿纱布包裹后放4°冰箱保存）。2. 组织处理：制成病理切片前需要进行组织处理（组织处理的好坏直接关系着后续切片的质量）。首先进行取材，大淋巴结垂直做平行切分，厚度约0.3—0.5cm，小于1cm的淋巴结对剖，然后固定（4%中性甲醛溶液12—24小时）、脱水、透明、浸蜡及包埋，上述步骤目前多在自动组织处理仪中完成。3. 制片：包埋后的标本置于组织切片机进行切片，切片厚度2~4μm，切片应平整、无刀痕或气泡，然后进行苏木素-伊红（HE）染色，HE切片是淋巴瘤病理诊断的最重要依据。染色应鲜艳、组织和细胞结构清晰、封固良好。

  第二步：组织病理学检查：1.组织形态学分析：制作好的HE染色切片移至显微镜下进行观察分析。HE形态学分析是淋巴瘤诊断的基础，甚为重要。首先通过观察HE形态学，可以基本确定患者是否为淋巴瘤，多数还能大致推测出是何种类型的淋巴瘤；其次，后续的辅助检查都必须在HE形态分析的基础上合理选择和使用，且辅助检查结果需要结合HE形态学正确解读才能做出正确的诊断。这个过程通常需要花费1—2个工作日。2免疫组化检查：免疫组化染色是辅助，但不可缺少。由于淋巴细胞在HE形态学上会有相似性，淋巴瘤单靠形态学诊断有时会有偏差，因此需要加做免疫组化辅助诊断。通过免疫组化检测，可以：判断肿瘤细胞系（B、T或NK细胞）、判断肿瘤细胞的分化阶段和成熟程度、鉴别良恶性、检测合病原微生物感染、检测免疫或靶向治疗靶点及提示疾病预后等。基于流式细胞术的免疫表型分析也是淋巴瘤诊断的重要辅助手段。这个过程通常需要3个左右的工作日。3. 遗传学与分子病理检测：通常结合HE分析和免疫组化检测，90%以上的淋巴瘤都能得到正确诊断，但仍有10% 的病例需要借助于遗传学及分子检测辅助诊断。这跟淋巴瘤的类型、取材标本是否足量等均有关。淋巴瘤中常用到的分子检测技术有：IG、TCR基因重排检测、FISH技术、PCR技术、测序技术及核型分析等。这个过程通常需要5个或更长的工作日时间。最后病理诊断医师综合HE形态学、免疫组化和/或分子检测综合分析，给出一份正确的且精准的病理诊断报告。

（郑州大学第一附属医院病理科 张丹丹）