一、分类与命名

嗜血杆菌属隶属于细菌域，变形杆菌门，y变形菌纲，巴斯德菌目，巴斯德菌科。目前属内有21个种，是专性寄生的苛养性细菌。本属细菌对营养要求严格，生长时需血液中存在的生长因子，人工培养时必须供给新鲜血液才能生长，故名“嗜血杆菌”。寄居于人体经过确认的嗜血杆菌有流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌、嗜血红素嗜血杆菌、副溶血嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、惰性嗜血杆菌、杜克雷嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌，以及未明确界定的副溶血嗜沫嗜血杆菌。

嗜血杆菌属的DNAG+C含量为37～44mol%，代表菌种为流感嗜血杆菌。

二、生物学特性

（一）形态与染色

嗜血杆菌是一群无动力、无芽孢的革兰阴性短杆菌或球杆菌，呈高度的异质性，大小为（0.2~0.5）μm ×(0.5~3.0)μm（或更长）。从病灶中新分离的菌株多呈球杆状、双球状或短链状，在陈旧培养物中呈多形性（长杆状或呈长丝状）。流感嗜血杆菌产毒株在营养丰富的培养基上生长6～18小时出现明显荚膜，在陈旧培养基上荚膜常消失，多数菌株有菌毛。

（二）培养特性

嗜血杆菌对营养要求较高，需氧或兼性厌氧，在补充5%～10%CO2的大气中生长良好，最适生长温度为35~37℃，pH7.6~7.8，在pH7.6条件下生长最好。在室温下比在4℃时更容易存活，用脱脂牛乳冷冻干燥于-70℃下可存活2年以上。嗜血杆菌生长需要X因子、V因子或两者之一。X因子是一种对热稳定的血红素及其衍生物，是一种含铁的卟啉，为细菌

合成过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶的辅基，供细菌氧化还原时进行电子传递。V因子是一种对热不稳定的维生素B类物质，即烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD，辅酶Ⅰ）或NAD磷酸盐（NADP，辅酶Ⅱ），存在于血液及某些植物组织中，是脱氢酶的辅酶，在细胞的呼吸中起递氢的作用。红细胞中富含X及V因子，因而实验室中常用巧克力琼脂培养基分离培养嗜血杆菌。由于羊血中含有水解V因子的酶类（NAD酶，NADase），因此，V因子依赖性的嗜血杆菌通常不能在含有完整红细胞的羊血琼脂上生长。嗜血杆菌在马血或兔血巧克力琼脂上生长较羊血巧克力琼脂好，如果要用羊血制作巧克力琼脂，应添加1.5mg/L NAD。血液中的嗜血杆菌可在含有5%新鲜马血或兔血的血琼脂上生长，某些种可呈β溶血。嗜血杆菌在巧克力琼脂培养基上经24小时孵育可形成直径为1-2mm大小的菌落，其典型菌落特征为圆形、湿润、光滑（大部分流感嗜血杆菌）或粗糙（大部分副流感嗜血杆菌）、透明或半透明（也呈露滴样）、无色至灰白色的菌落，有荚膜的菌株可呈黏液性菌落（直径为1～3mm）。小菌落型嗜血杆菌在HTM平板上生长不良或不生长（这直接影响到嗜血杆菌药敏试验结果的观察）。嗜血杆菌的纯培养物散发出类似“鼠穴”的气味，这是由于色氨酸代谢产生的吲哚所致。

呼吸道标本中的嗜血杆菌在初代培养时，受到革兰阳性细菌的抑制（营养竞争及菌素作用），菌落细小不易与其他细菌相区别，这是造成嗜血杆菌分离率低的直接原因。嗜血杆菌在巧克力琼脂上生长速度不仅取决于生长因子X、V的存在，同时与革兰阳性细菌的生长干扰有关，因此应用选择性培养基可抑制革兰阳性细菌的生长，从而达到选择分离的目的。在巧克力培养基中加入30～50mg/L的万古霉素或300mg/L杆菌肽（或其他革兰阳性细菌抑制剂），可显著提高嗜血杆菌分离率。原因是，当在培养基中加入万古霉素后，抑制了革兰阳性细菌的生长，增加了对嗜血杆菌的选择性，嗜血杆菌在加万古霉素的培养基上，菌落生长较大，容易识别，从而提高了嗜血杆菌的分离率。在怀疑囊性纤维化患者感染嗜血杆菌时（非分型的流感嗜血杆菌明显是这些患者的病原菌），由于大量黏液样铜绿假单胞菌的存在，覆盖了流感嗜血杆菌的菌落，这种情况应该采用在选择性培养基上接种和在厌氧环境中培养，可取得满意的效果。如果怀疑有软下疳患者，其淋巴穿刺物应该接种在选择性营养丰富的培养基上（如Hammond淋球菌培养基或菲尔兹培养基等），在5%～10%CO2的大气环境33~35℃孵育72小时（有文献显示33℃培养时杜克雷嗜血杆菌的分离率更高），为了防止对万古霉素敏感菌株的漏检，使用两种培养基可提高分离率。

（三）生化特性

嗜血杆菌可发酵葡萄糖（最终产物为乙酸、乳酸和琥珀酸）及其他碳水化合物，产酸、少数菌株产气，氧化酶、触酶反应不定，能还原硝酸盐为亚硝酸盐。生化试验可以将嗜血杆菌鉴定到种的水平。

三、临床意义

嗜血杆菌属细菌寄生在人和多种动物的黏膜，在人体内主要寄生在咽喉及口腔黏膜，少见于消化道和生殖道。主要引起人类疾病的嗜血杆菌有流感嗜血杆菌（包括埃及嗜血杆菌）、副流感嗜血杆菌、杜克雷嗜血杆菌和嗜沫凝聚杆菌，溶血嗜血杆菌、副溶血嗜血杆菌、副嗜沫凝聚杆菌和惰性凝聚杆菌很少引起感染。流感嗜血杆菌主要引起人类急性化脓感染（急性咽炎、喉炎、气管炎、肺炎、中耳炎、鼻窦炎、心内膜炎、败血症、脑膜炎等）及严重的继发感染。杜克雷嗜血杆菌是引起软性下疳的病原菌，是以生殖器表浅性溃疡并伴有腹股沟淋巴结炎的性传播疾病，50%的患者有单侧腹股沟淋巴结炎。

有荚膜的流感嗜血杆菌根据荚膜多糖抗原可分为a、b、c、d、e、f 6个血清型，也被称为“可分型菌株”，无荚膜的菌株则被称为“非分型菌株”。其中b型菌株的致病力最强。

（濮阳市安阳地区医院 刘欣）