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实验室检测技术助力丙型肝炎防控 |
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□薛秀娟
为消除病毒性肝炎公共卫生威胁，2021年9月15日，国家卫生健康委等9部委联合发布消除丙型肝炎公共卫生危害行动的工作方案，要求全面落实国家丙型肝炎防治措施和保障措施，最大限度遏制新发感染，有效发现和治愈患者，显著降低丙型肝炎导致的肝癌和肝硬化死亡。
丙型肝炎是一种由HCV（丙型肝炎病毒）引起的主要经血液传播、以肝损害为主的疾病。其发病隐匿，临床症状不典型，慢性化程度高。
HCV感染呈全球流行态势，不同性别、年龄、种族的人群均易感，目前尚无预防性疫苗。
HCV感染标志物
HCV暴露后1周~2周可检测到HCV RNA（丙型肝炎病毒核酸），HCV RNA达到高峰的时间略早于ALT（血清丙氨酸氨基转移酶）水平达到峰值的时间。
HCV cAg（丙型肝炎病毒核心抗原）在HCV RNA出现后的1天~2天出现，以游离形式存在的HCV cAg与HCV RNA水平呈正相关。之后的6周~10周被称作血清学抗体检测的“窗口期”，在此期间HCV抗体无法被检测到。
因此，机体暴露于HCV后出现HCV感染的标志物的顺序为，先出现HCV RNA和HCV cAg，随后出现HCV抗体。
HCV感染检测
HCV RNA定量检测 HCV RNA定量检测结果是判断感染病毒后病毒是否复制的标志，反映血液中HCV的有和无、多和少。
如果HCV RNA定量检测结果为阳性，表明是丙型肝炎现症感染，机体内有HCV复制。核酸定量检测可以帮助医生选择和确定更加精准的治疗方案。
检测原理主要基于PCR（聚合酶链式反应）技术。
检测方法包括TMA（转录介导扩增）技术、RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）技术、分支DNA（脱氧核糖核酸）技术和RT-qPCR（实时荧光定量聚合酶链式反应）技术。
由于HCV RNA定量检测技术对检测人员、标本、实验室环境和设备的要求比较高，难以在基层医疗卫生机构开展，也不适用于HCV感染的大规模筛查。
HCV cAg检测 HCV cAg是HCV的一种核衣壳多肽，在病毒组装过程中释放到血浆中，可以在HCV感染早期和整个HCV感染过程中检测到。
常用的检测方法为酶联免疫法、化学发光法等。HCV cAg检测的灵敏度不如HCV RNA检测，但是HCV cAg检测的成本相对较低，更适合在基层医疗卫生机构开展。因此，在无法进行HCV RNA检测时，可选择HCV cAg检测作为替代方法，以用于早期急性丙型肝炎和现症感染的辅助诊断。
HCV抗体检测 人体感染HCV后，免疫系统会在6个月内产生抗体，HCV抗体检测可以判断人体感染HCV的免疫反应情况。
HCV抗体是丙型肝炎筛查的常规指标之一，但是存在平均70天的“窗口期”。HCV抗体检测阳性意味着人体已感染HCV。
HCV抗体检测阳性后，需要进一步进行核酸检测，以确定患者是否为现症感染状态。想要确诊丙型肝炎，HCV抗体是必不可少的检查项目。
常用的检测方法包括ELISA（酶联免疫吸收分析）、CLIA（化学发光免疫分析）、RDTs（快速检测）、WB（免疫印迹）。
对于个别因免疫缺陷或免疫系统发育不全者，HCV抗体检测结果可持续为阴性，因此可能存在漏检风险。因为抗体检测有“窗口期”，所以不适用于HCV感染的早期检测。
此外，HCV抗体可终身携带，HCV抗体阳性不代表体内一定有HCV复制，不能用于监测抗病毒疗效。
其他辅助检查 包括生化检查、肝组织病理组织学检查、影像学检查等。这些辅助检查可以帮助医生做出临床诊断，也可以对确诊病例区分急性、慢性丙型肝炎和丙型肝炎肝硬化时作为重要参考。
尽早明确诊断是防治丙型肝炎的关键，HCV检测是诊断HCV感染的重要依据。
综合以上3种检测方法的优缺点和应用场景的不同，建议联合使用两种及以上的检测方法，定期检查是监测疾病发展的有效手段。
（作者供职于河南省疾病预防控制中心）
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